標本采集和運送方法
(一)血標本,。
1.采集出疹后28天內(nèi)病例靜脈血2~3ml,,加入到無菌試管中,標明采集日期和病例姓名,、編號,。
2.有條件地區(qū)可用1500rpm/20分鐘離心機分離血清。如果沒有離心機,,在室溫下凝固分離血清,,或冷藏條件下放置,,直到血清完全析出。
3.在無菌條件下,,將血清移至外螺旋蓋帶墊圈的無菌管中,,避免吸到紅血球。
4.血清標本運送前應(yīng)在2~8℃保存,,如果7天內(nèi)不能運送的,,應(yīng)置-20℃以下保存,避免反復(fù)凍融,。全血標本不能凍結(jié),。
5.填寫完整的標本送檢表,送檢表上要注明病例編號,。
6.對出疹3天內(nèi)麻疹IgM抗體陰性者,,可于出疹后4-28天再采集第2份血標本。
(二)病原學(xué)標本,。
采集病原學(xué)標本的要求是在暴發(fā)疫情早期,,至少采集2例(<10例病例的暴發(fā))或5例(≥10例病例的暴發(fā))新發(fā)病例的病原學(xué)標本。
1.鼻咽拭子標本
(1)采集出疹前5天至出疹后5天的鼻咽拭子標本,。
(2)使用的棉拭子和試管等應(yīng)滅菌,。
(3)用無菌棉拭子適度用力在鼻咽部和咽喉部擦拭,獲得上皮細胞,。
(4)把拭子放入有外螺旋蓋并裝有2ml病毒運輸液的凍存管中,。
(5)病毒運輸液有商業(yè)成品可用。常用的病毒運輸液包括:
pH 7.4~7.6的Hank’s液:在90ml蒸餾水中加入10mlHank’s,,然后加入10ml牛血清和0.2ml 0.4%酚紅溶液,,過濾消毒。加1ml青/鏈霉素溶液,。分裝到無菌管中,,于4℃儲存?zhèn)溆谩?/span>
組織培養(yǎng)液:DMEM液加入青/鏈霉素使其終末濃度分別為500~1000IU/ml和500~1000ug/ml,加入胎牛血清使其終末濃度為2%,,加入谷氨酰胺至濃度為1%,;加入7.5%的NaHCO3調(diào)節(jié)pH至7.4~7.6。
2.尿標本
(1)采集出疹前5天至出疹后5天內(nèi)的尿標本10~50 ml,。尿液應(yīng)收集在滅菌容器中,,2~8℃保存。
(2)尿中的脫落上皮細胞含有麻疹病毒,,通常應(yīng)在24小時內(nèi)離心,。4℃,轉(zhuǎn)速500g(約1500 rpm),,離心5分鐘,。
(3)棄上清,,并用2~3ml病毒運輸液懸浮沉淀,置于有外螺旋蓋的凍存管中,。
(4)在離心懸浮沉淀前不要冷凍尿液,。
二、標本運送
(一)血標本,。
1.標本采集后應(yīng)在48小時內(nèi)送到實驗室,,嚴防標本污染或容器滲漏。標本標簽應(yīng)清晰,、防水,。
2.標本運送時附帶標本送檢表,送檢表上要注明病例編號,。安排運送日期并通知實驗室,,說明標本送達時間。
(二)病原學(xué)標本,。
1.鼻咽拭子,、尿液等病原學(xué)標本采集后應(yīng)立即置2~8℃保存。尿液離心后重懸的沉淀可在2~8℃保存,。
2. 病原學(xué)標本應(yīng)盡快送達省級麻疹實驗室,。48小時內(nèi)能送達的,可在2~8℃保存,,否則-70℃保存,。無-70℃保存條件者,可在-20℃保存,,但要在1周內(nèi)送達,。在-70℃條件下保存的標本,1個月內(nèi)送達省級麻疹實驗室,。
3.標本應(yīng)在2~8℃運輸,嚴防標本污染或容器滲漏,。
4.標本保存和運送過程應(yīng)避免日光照射,。
5.其他送檢要求與血清標本相同。
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