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　　近期，我中心在處理湖南,、安徽3例人感染高致性禽流感病例的過程中,，對人禽流感病例標(biāo)本的采集及實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)有幾點(diǎn)體會，供大家參考,。

　　一,、盡早采集病人的呼吸道標(biāo)本

　　要及時(shí)、規(guī)范的采集不明原因肺炎或可疑人禽流感病例的呼吸道標(biāo)本,。最佳采集時(shí)間為發(fā)病后3天內(nèi),，如錯過最佳時(shí)間，仍應(yīng)盡早采集,，一般采集7天內(nèi)標(biāo)本,。如果第一份標(biāo)本核酸檢測陰性，應(yīng)立即再次采集呼吸道標(biāo)本,。上呼吸道包括鼻拭子,、鼻咽拭子、鼻咽抽提物,、鼻洗液,、咽漱液；下呼吸道標(biāo)本包括呼吸道吸取物、支氣管灌洗液,、肺組織活檢標(biāo)本,。下呼吸道標(biāo)本最有利于分離到禽流感病毒。

　　標(biāo)本采集后要在病人床旁或現(xiàn)場分裝成一式三份,，以防止交叉污染,，其中兩份送中國疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行檢測、備份與復(fù)核,。

　　二,、血清標(biāo)本

　　如果沒采集到用于核酸檢測和病毒分離的急性期標(biāo)本，人禽流感病例的診斷或排除需雙份血清,，急性期血清在發(fā)病后7天內(nèi)采集,，恢復(fù)期血清在發(fā)病后第2、3,、4周采集,。如未能采集到急性期血清，仍應(yīng)盡早采集第一份血清,，并在間隔2～4周后采集第二份血清,。采集量要求5ml，以空腹血為佳,。

　　三,、對于死亡的可疑人禽流感病例盡可能獲得尸檢標(biāo)本

　　若病人死亡，依據(jù)《傳染病防治法》,，做好病人家屬的思想工作,，同時(shí)提前做好準(zhǔn)備，盡早進(jìn)行解剖,，采集肺,、氣管、肝臟等多器官組織標(biāo)本,。

　　四,、開展人禽流感標(biāo)本采集和檢測工作要達(dá)到相應(yīng)的生物安全要求

　　采集病人的標(biāo)本要采取二級防護(hù)措施，人禽流感標(biāo)本的處理,、實(shí)驗(yàn)室檢測要在生物安全二級或三級實(shí)驗(yàn)室操作,。

　　五、采取適宜的實(shí)驗(yàn)室檢測方法

　　具備資質(zhì)的各省級實(shí)驗(yàn)室首先應(yīng)用RT-PCR或Real－Time PCR,，對采集的上呼吸道,、下呼吸道和尸檢標(biāo)本進(jìn)行禽流感病毒核酸檢測。有條件的省份可進(jìn)行病毒的分離,、鑒定和微量中和試驗(yàn),。

　　六,、標(biāo)本的保存和送檢

　　用于病毒分離和核酸檢測的標(biāo)本應(yīng)盡快在24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行檢測，24小時(shí)能檢測的標(biāo)本可置于4℃保存,，如不能于24小時(shí)內(nèi)接種的標(biāo)本則應(yīng)置于-70℃或以下保存,。血清可在4℃存放3天，-20℃以下長期保存,。標(biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本的包裝上要注明樣本編號、姓名及采樣日期,。符合上送要求的標(biāo)本要在24小時(shí)內(nèi)送中國疾控中心,。

　　各省需要向中國疾病預(yù)防控制中心送檢標(biāo)本時(shí)，應(yīng)先與中國疾控中心疾病控制與應(yīng)急處理辦公室聯(lián)系(電話,、傳真：010-83153724),。具體要求見中疾控疾發(fā)[2005]526號文件中《疑似人禽流感/不明原因肺炎病例標(biāo)本送檢、接收,、檢測和結(jié)果報(bào)告反饋工作流程》,。

　　中國疾病預(yù)防控制中心

　　2005年12月2日