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　　寨卡病毒(Zika Virus)屬黃病毒科（Flaviviridae）黃病毒屬（Flavivirus）,，呈球形，直徑約為40-70nm,，有包膜,。基因組為單股正鏈RNA,，長度約為10.8Kb,，可分為亞洲型和非洲型兩個基因型。 

　　寨卡病毒病的檢測方法包括病毒核酸檢測,、IgM抗體檢測,、中和抗體檢測和病毒分離等。寨卡病毒與黃病毒屬其他病毒具有較強的血清學(xué)交叉反應(yīng),，目前主要采用病毒核酸檢測,。 

　　一、檢測對象 

　　（一）疑似和臨床診斷病例,。 

　　（二）伊蚊成蚊和幼蟲,。 

　　二、樣本采集,、保存和運輸 

　　（一）病例標(biāo)本采集 

　　對懷疑感染寨卡病毒的患者,，要盡早采集血標(biāo)本，同時要采集尿液和唾液標(biāo)本,。如果臨床高度懷疑男性為寨卡病毒病,，在上述標(biāo)本無法確診時，可考慮采集精液開展檢測,。 

　　血液標(biāo)本采集辦法：用無菌真空干燥管,，采集患者非抗凝血5 ml，及時分離血清,，分裝2管,，保存于帶螺旋蓋、內(nèi)有墊圈的凍存管內(nèi),，標(biāo)記清楚后低溫保存,，其中1管用于現(xiàn)場實驗室檢測，1管用于上級疾病預(yù)防控制機構(gòu)復(fù)核,。對病例應(yīng)盡可能采集雙份血液標(biāo)本,，兩份標(biāo)本之間相隔14天為宜,，住院病例可于入院當(dāng)天和出院前1天各采集一份。 

　　尿液標(biāo)本的采集方法:采集尿液標(biāo)本10ml,，置于無菌50ml塑料尖底離心管中，2000rpm離心5min去沉淀,，將上清液分裝至無菌15ml離心管中,，每份5 ml。如需采集精液標(biāo)本,，應(yīng)在采集精液標(biāo)本前采集尿液標(biāo)本,。 

　　唾液標(biāo)本的采集方法:將唾液吐入50ml塑料尖底離心管中，4000rpm離心15min去沉淀,，將離心后上清液分裝,，分裝2管，每份1 ml,，保存于帶螺旋蓋,、內(nèi)有墊圈的凍存管內(nèi)后保存。 

　　采集精液開展實驗室檢測時,，需采集標(biāo)本1～2 ml,，置于無菌干燥、帶螺旋蓋,、內(nèi)有墊圈的凍存管內(nèi)后保存,。 

　　（二）蚊媒標(biāo)本采集 

　　疫點內(nèi)采集的伊蚊成蚊及幼蟲，分類鑒定后,，填寫媒介標(biāo)本采集信息表,，按照采集地點分裝，每管10～20只,。 

　　（三）標(biāo)本保存,、運送 

　　如標(biāo)本能夠在24小時內(nèi)開展實驗室檢測，應(yīng)將標(biāo)本置于2～8℃保存,；不能及時檢測的標(biāo)本應(yīng)盡快置于-70℃以下保存,。 

　　標(biāo)本運送時采用低溫冷藏運輸，避免凍融,，樣本運輸應(yīng)遵守國家相關(guān)生物安全規(guī)定,。 

　　三、檢測方法 

　　寨卡病毒病的檢測方法包括病毒核酸檢測,、IgM抗體檢測,、中和抗體檢測和病毒分離等。寨卡病毒與黃病毒屬其他病毒具有較強的血清學(xué)交叉反應(yīng),，目前主要采用病毒核酸檢測,。 

　　開展蚊媒寨卡病毒檢測時,，主要對捕獲的伊蚊成蚊或幼蟲進行病毒核酸檢測和病毒分離。 

　　開展寨卡病毒實驗室檢測時,，應(yīng)同時考慮登革病毒和基孔肯雅病毒感染可能,。登革病毒和基孔肯雅病毒實驗室檢測應(yīng)按照相應(yīng)的技術(shù)指南開展。 

　　（一）臨床標(biāo)本檢測 

　　1．病原學(xué)檢測 

　　病原學(xué)檢測主要適用于急性期血液標(biāo)本,，一般認(rèn)為發(fā)病7天內(nèi)檢測陽性率高,。 

　　（1）核酸檢測：采用熒光定量RT-PCR方法，是目前早期診斷寨卡病毒病的主要檢測手段,?？刹捎弥袊膊☆A(yù)防控制中心病毒病所發(fā)放的熒光定量PCR試劑或其他商品化試劑盒進行檢測。 

（2）病毒分離：將標(biāo)本接種于蚊源細(xì)胞（C6/36）或哺乳動物細(xì)胞（BHK21,、Vero）進行分離培養(yǎng),，出現(xiàn)病變或5～7天以后，用檢測核酸的方法鑒定病毒,。也可使用乳鼠腦內(nèi)接種進行病毒分離,。 

　　2．血清學(xué)檢測 

　　（1）血清特異性IgM抗體：發(fā)病3天后可檢出病毒特異性IgM抗體，但發(fā)病7天后檢出率高,?？刹捎?span lang="EN-US">ELISA、免疫熒光等方法檢測,。IgM抗體陽性,，提示患者可能新近感染寨卡病毒，但寨卡病毒IgM抗體與登革病毒,、黃熱病毒和西尼羅病毒等黃病毒有較強的交叉反應(yīng),，易于產(chǎn)生假陽性。 

　　（2）中和抗體：采用空斑減少中和試驗方法檢測,?；颊呋謴?fù)期血清中和抗體陽轉(zhuǎn)或滴度較急性期呈4倍及以上升高，且排除登革,、乙腦等其他常見黃病毒感染,，可以確診。 

　　3．其他標(biāo)本檢測 

　　尿液,、唾液和精液標(biāo)本的檢測可用血清病毒RNA提取試劑盒及核酸特異性檢測試劑進行檢測,，結(jié)果判定同血清標(biāo)本。 

　　（二）媒介標(biāo)本檢測 

　　1．標(biāo)本處理 

　　將分類后的伊蚊成蚊或幼蟲,，按照采集地點,，每10～20只為一份進行研磨處理。 

　　2．病毒核酸檢測 

　　用RT-PCR的方法進行寨卡病毒核酸檢測,。 

　　3．病毒分離 

　　病毒核酸陽性的標(biāo)本進行病毒分離,。 

　　四,、生物安全 

　　    寨卡病毒按照第三類病原微生物進行管理。凡涉及寨卡病毒的分離,、培養(yǎng),、未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料等的操作應(yīng)在生物安全二級（BSL-2）實驗室進行；滅活材料和無感染性材料的操作可在生物安全一級（BSL-1）實驗室進行,。病毒培養(yǎng)物的運輸應(yīng)滿足國際民用航空組織公布的《危險物品安全航空運輸技術(shù)細(xì)則》（Doc9284號文件）A類感染性物資的包裝要求,，對應(yīng)的聯(lián)合國編號為UN2814;未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料（包括患者血、尿液,、唾液或動物體液標(biāo)本以及現(xiàn)場采集的媒介生物標(biāo)本等）運輸時應(yīng)滿足B類感染性物質(zhì)的包裝要求,，對應(yīng)的聯(lián)合國編號為UN3373,。開展相關(guān)運輸活動須按照原衛(wèi)生部發(fā)布的第45號令《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》進行審批后,，方可實施運輸。